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dianji次数:215 发瞛i奔洌?020-06-03

原代细胞培养是建yi细胞系dedi一步,但是有很多xiaohuo伴zai原代细胞上jiuhui有很多疑惑哦,主要有以下几大问题,xiao编都为大家整理好咯,ban上你dexiaoban凳,一起lai看看!

 一、原代细胞与细胞系有什么区别?

答:根据chuan统定义,自组织di一次收huo和接种de细胞bei称为原代细胞,这类细胞直接cong组织分离,生命周期有限,jing数次chuan代后huizhujian停zhi生长。原代细胞zai有限de生命周期内需掌wo好细胞de大生长空间,以保持细胞qun中ji因型和biao型de一致性。

细胞系是不断生长、分化de细胞qun,因其jing过遗chuan改造,致shi其具有无限zeng长de潜neng。体外生长de细胞系用于医liao或科褁iaoⅫ/p>

但实ji上,jing过长时间、连xudechuan代培养后,细胞系随着代数dezeng加,细胞deji因型和biao型都有keneng发生改变。

需要zhi出de是,zai不同de科研xiao组中这些术语de定义hui有所不同。许多研究员不用细胞系这个cibiao示细胞qun,除非细胞jing过liao遗chuan改造。 

二、倍zeng和代数有什么区别?

答:倍zeng是培养物中细胞总数de翻倍,通常是zhi细胞zhi数或对数生长期。代数是zhi细胞quncong培养瓶中移出,chuan代培养过程de次数,chuan代培养de目de,是shi细胞处于祎u躣u以ci激其jin一步生长。 

 三、接收到dedong存细胞该如何处理?

答:收到包装箱后,立即将dong存细胞cong干冰移入液dan中dong存。此过程尽量kuai,以避免升温。不要将细胞储存zai-80℃,这样hui对细胞造cheng不ke挽回de伤hai。 

四、dong存de细胞该如何开始培养?

答:主要分为以下9dian:

1.将一guan细胞cong液dan罐中取出,zhu意保护手和眼jing。

2.将dong存guankuai速de放入37℃水浴中,轻轻wo住并旋转,直到guan内物体wan全rong化。

3.将dong存guan立即cong水浴中拿出,擦干,转入无junhuan境。

4.用70%de酒精冲洗dong存guan,然后擦去多余酒精。

5.打开盖子,zhu意手zhi不要碰到里面de螺纹(zhu意,由于dong存guan有负压,开盖时kenenghui有少量溢出,这是正常现象)。

6.用多聚赖氨suan(或can照说明书)包bei培养瓶。多数细胞推荐de接种midu为每平方厘米5000个细胞。

7.盖好培养瓶de盖子,轻轻摇粀en嘌恳詓hi细胞分布均匀。若需要气体交换ke打开盖子。

8.将培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)

9.放入培养箱后第6-16xiao时更换一磜en嘌鴍i,以去除残留de二jiaji亚feng和蝐i赿e细胞。 

wu、细胞培养过程中,多久更换一磜en嘌鴍i?

这取jue于细胞生长de速du。襤ua愣?-3tian更换一磜en嘌鴍i,许多细胞培养实验室通常zai周一,周三,周wu更换培养ji。

zhu意:dong存细胞复苏后,zai6-16xiao时内更换培养ji,以去除残留de二jiaji亚feng和死wangde细胞。 

六、我neng扩zeng培养和再次dong存原代正常人类细胞吗?

答:这取jue于细胞de类型。一些细胞类型像shenjing细胞,shenjing胶zhi细胞和一些生长缓慢de上pi细胞,不推荐扩zeng培养和再次dong存。其它de细胞类型像cheng亚bo平台细胞、星形细胞、肾蟙eは赴⑿切谓簔hi细胞等等,ke以扩zeng培养和再次dong存。

然而,需要zhu意de是再次dong存de过程kenengdao致细胞生长性nengde改变。

qi、培养瓶中应该加入多少体积de培养ji?

答:我们推荐de用量为:T-25培养瓶5ml,T-75培养瓶15ml,T-150培养瓶30ml。

 

    

 
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