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点击次数:115 发布时jian:2020-06-16

我们知道,Elisa试ji盒可分为多种类型ceding,是一种guang泛应用在ceding液体样ben中的蛋白、抗体、或ji素的免疫分析技术。 我公司技术部将各种Elisachang用方法的优势劣势进行对比,结果如下:

一、直接法(direct Elisa)

将抗原直接固ding在固xiang载体上,jia入酶biaoji的一级抗体,即可ceding抗原总量,此一级抗体的teyi性非chang重要。

1.优势:操zuo手续简duan,因wuxu使用二抗可避免交互反应。

2.劣势:试验中的一抗du得用酶biaoji,但不是每种抗体du适合做biaoji,费用xiang对ti高。

二、jian接法(indirect Elisa)

此ceding方法与直接法类似,差bie在于一级抗体mei有酶biaoji,改用酶biaoji的二级抗体qu辨识一级抗体来ceding抗原量。

1.优势:二抗可以jia强信号,而且有多种选ze能做不同的ceding分析。不jia酶biaoji的一级抗体则能保liu它zui多的免疫反应性。

2.劣势:交互反应发生的ji率较高。

三、shuang抗体夹心法(sandwich Elisa)

bei检ce的抗原包bei在两ge抗体之jian,其中一ge抗体将抗原固ding于固xiang载体上,即捕zhuo抗体。另一ge则是检ce抗体,此抗体可用酶biaoji后直接ceding抗原的量;或不biaoji,zai透过酶biaoji的二级抗体来ceding抗原的量。这两种抗体必xu小心选qu,才可避免交互反应或jing争xiang同的抗原结合部位。

1.优势:高灵敏、高专一性,抗原wuxu事先纯化。

2.劣势:抗原襤uanǖ糜涤辛絞e以上的抗体结合部位。

四、jing争法(competitive Elisa)

 样ben里的抗原(自由抗原)和纯化并固ding在固xiang载体上的抗原(固ding抗原)一起jing争xiang同的抗体,当样pin里的自由抗原yue多,jiu可襶ue岷蟳ue多的抗体,而固ding抗原jiu只能结合到较少的抗体,反之亦然。经清洗bu骤,洗qu自由抗原和抗体的复合物,只liu下固ding抗原和抗体的复合物,拿来与只有固ding抗原的对照zu结果xiang比较,根据呈色差yijiu可计算出样pin里的抗原含量。

1.优势:可适用比较不纯的样ben,而且数据zai现性很高。

2.劣势:zheng体的敏感性和专一性du较差。

五、ELISA技术:基于细bao法(cell-based Elisa)

是一种新的ding性蛋皕hun靋e技术,将细bao直接在weikong板里培养,待检ce时,不xu抽ti蛋白和lie解细bao,便可直接ce量weikong板里蛋白经磘anせ蛞种苲uo用后的变化。

1.优势:wuxulie解细bao,suo以目biao蛋白sun失zui少,可ceding完zheng细bao、黏附细bao、还有非粘附细bao。

2.劣势:不能ceding抗原量。

以上这xie您du明白了吗?想要了解更多xiang关内rong咨询。

 
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